Sledovanie vplyvu špecifických elementov regulácie replikácie plazmidu R1 na základe konštrukcie plazmidov

V tejto práci sa zameriavame na konštrukciu expresných systémov založených na plazmide R1. Plazmid R1 je nízkokópiový plazmid, ktorý patrí do skupiny IncFII. Počiatočný replikón je malej veľkosti a zvyčajne obsahuje počiatok replikácie (ori), vo väčšine prípadov obsahuje aj štruktúrny gén (rep) pre iniciačný proteín (Rep) a v neposlednom rade zahŕňa aj genetickú informáciu pre reguláciu replikácie (cop). Cieľom tejto práce je konštrukcia série plazmidov optimálne a finančne nenáročných expresných systémov v baktérii Escherichia coli, ktoré budú potrebné na monitorovanie vplyvu jednotlivých regulačných elementov plazmidu R1 v kombinácii s T7 a P_BAD  promotórmi. Expresné systémy majú  uplatnenie pri produkcii rekombinantných proteínov, ktoré sa využívajú v rôznych priemyselných odvetviach ako farmaceutický priemysel, potravinársky, chemický, textilný a mnoho ďalších. V blízkej budúcnosti plánujeme inzerciu zeleného fluorescenčného proteínu (GFP) downstream od miesta kódujúceho RepA proteín. Následne budeme monitorovať mieru expresie regulačného proteínu RepA pomocou senzitívnej metódy prietokovej cytometrie. Nové zistenia z tejto práci napomôžu v budúcnosti pri štúdiách v oblasti produkcie rekombinantných proteínov a konštrukcie expresných systémov založených na tomto plazmide.