Karboanhydráza IX ako možný prognostický biomarker asociovaný s kolorektálnym karcinómom

Kolorektálny karcinóm (CRC) predstavuje významný globálny zdravotný problém. Ide o tretie najčastejšie nádorové ochorenie s vysokým výskytom aj v Slovenskej republike. Biomarkery zohrávajú dôležitú úlohu pri detekcii a liečbe pacientov s CRC. V rámci diagnózy sa určujú rôzne prognostické a prediktívne faktory, ktorých výber je založený na hodnotení klasických ukazovateľov prognózy a prognostických faktorov charakterizujúcich biologickú aktivitu nádoru [1,2]. Hypoxiou-indukovaná karbonická anhydráza IX (CA IX) je exprimovaná v širokom spektre nádorov, vrátane CRC. V korešpondujúcich normálnych tkanivách je jej expresia výrazne obmedzená. CA IX prispieva k prežívaniu buniek v nádorovom mikroprostredí s kyslým pH a má významnú úlohu v adhézii a migrácii nádorových buniek. V súčasnosti je tento proteín predmetom intenzívneho vedeckého záujmu ako potenciálny nádorový biomarker. Všeobecne sa začína akceptovať názor, že expresia CA IX je asociovaná s nepriaznivou prognózou nádorového ochorenia [3–5]. V našej práci sme imunohistochemicky vyšetrili parafínový materiál zo 70 vzoriek kolorektálnych karcinómov. Z každej vzorky boli pripravené 4 µm hrubé rezy na imunohistochemické reakcie na dôkaz CA IX s použitím automatu Ventana Benchmark Ultra (Roche). Monoklonálna protilátka proti CA IX (klon: H-11; Zeta corporation) bola riedená v pomere 1:300. Reakcia bola vizualizovaná Fast Red chromogénom (Roche). Pri interpretácii získaných imunohistochemických vyšetrení sme semikvantitatívne hodnotili percento pozitívnych buniek, subcelulárnu lokalizáciu a intenzitu imunoreakcie. CA IX bola exprimovaná v 59/70 prípadoch kolorektlánych karcinómov (84,3%). Menej ako 25% CA IX-pozitívnych buniek bolo prítomných v 21/59 prípadoch (35,6%) a menej ako 50% pozitívnych buniek v 20/59 prípadoch (33,9%). Viac ako 50% pozitívnych buniek sme detegovali v 18/59 prípadoch CRC (33,9%). Zistili sme dva druhy imunohistochemickej pozitivity. V 53/59 vzorkách (89,8%) bola pozorovaná membránová pozitivita a v 6/59 vzorkách (10,2%) dominovala kombinovaná (membránová aj cytoplazmatická) pozitivita. Intenzita imunoreakcie bola v 57/59 prípadoch (96,6%) silná a v 2/59 prípadoch (3,4%) stredná. Na základe našich predbežných výsledkov sa domnievame, že sa CA IX môže stať dôležitým plauzibilným diagnostickým a prognostickým biomarkerom, ktorý by mohol byť využitý v každodennej praxi pri analýze karcinómov v kolorektálnej oblasti. Študovaný súbor pacientov plánujeme rozšíriť a získané výsledky budeme ďalej korelovať s vybranými klinicko-morfologickými a viacerými imunohistochemickými parametrami a zisťovať ich vzájomný vzťah.